Post by alamin on Aug 2, 2023 0:29:25 GMT -5
胞系HL-7702（CL-0111）和小鼠肝细胞系AML12（AML12）购自Procell。HL-7702细胞在RPMI 1640培养基（GIBCO，72400120）中培养，AML12细胞在AML12特殊培养基（CM-0602）中培养。人原代肝细胞购自 BioreclamationIVT (M00995)，并在 HM 培养基中培养，如其他地方报道的。34根据细胞密度每隔一天或每天更换一次培养基。每隔一天或每三天用包含 EDTA 的 0.25% 胰蛋白酶（GIBCO，25200056）消化 HL-7702 和 AML12，并传代。通
取小 RNA，将 10 体积的 1 M NaCl 添加到凝胶中。，将破亚洲手机号码列表碎的凝胶在4℃下连续振荡过夜，2000×离心 g 5 min，将上清液加入新管中。根据制造商手册，使用 mirVana miRNA 分离试剂盒分别纯化 14–50 nt 和 50–100 nt RNA。检测小RNA浓度后，-80℃保存。 tsRNA测序文库构建 小RNA文库是从储存在RNAlater中的CCl 4诱导小
鼠的肝脏构建的。该测序对每个样本使用了两个独立的生物重复。首先，我们检查了总RNA样品的完整性和浓度，以及预处理的总RNA样品，以去除一些阻碍tsRNA文库构建的修饰。例如，m 3 C和m 1的去甲基化A可增强逆转录；需要通过 5'-接头连接将 5'-OH（羟基）磷酸化为 5'-P；需要进行 3'-接头连接以去除 3'-cP（2',3'-环状磷酸盐）；脱
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